Хроматография на HPLC колона
2. Кроматографска колона (тип въртене)
3. Кроматографска колона (ръководство)
*** Ценовата листа за цялото по -горе, попитайте ни да получим
Описание
Технически параметри
Хроматография на HPLC колона, известен също като високоефективна течна хроматография (високоефективна течна хроматография), е колона течна хроматография с висока ефективност на разделяне и също е важен клон на хроматографията.
Той разделя компонентите в пробата според разликата в адсорбционната сила и коефициента на разделяне между фиксираната фаза и подвижната фаза. Под инфузионна система с високо налягане, подвижна фаза (обикновено един разтворител или смес от разтворители с различни полярности) се изпомпва в колона, съдържаща неподвижна фаза. Когато всеки компонент в пробата преминава през колоната за хроматограма, поради различния размер и здравина на взаимодействието със стационарната фаза (като адсорбция, разпределение, изключване, афинитет), времето за пребиваване в стационарната фаза също е различно, така че да се постигне разделянето на всеки компонент. След това отделените компоненти влизат в детектора за откриване, като по този начин получават качествена и количествена информация на всеки компонент.
Параметър
Приложения във фармацевтичния анализ
Прилагане на хроматография на HPLC колона при анализ на лекарството
Като важна технология за анализ на разделянето, високоефективната течна хроматография (HPLC) показа голям потенциал и стойност на приложението в областта на фармацевтичния анализ след бързото си развитие през 70 -те години. Комбинирайки принципите на разделяне на класическата течна хроматография и газовата хроматография, HPLC се превърна в незаменим инструмент в анализа на лекарствата за ефективното си разделяне, бърз анализ, отлична чувствителност към откриване и широк спектър от приложения.
Основни принципи и характеристики
Той използва взаимодействието на фиксираната и подвижната фаза, за да отдели постепенно различните компоненти на сместа. Стационарната фаза може да бъде твърда или течност, прикрепена към твърдо вещество, докато подвижната фаза е течност или газ. В HPLC разтворителят е принуден през колоната при високо налягане до стотици атмосфери, като значително подобрява ефективността на разделяне. Според различния механизъм за разделяне, HPLC може да бъде разделен на нормална фаза HPLC, обратна фаза HPLC, йонен обмен HPLC и изключване на обема HPLC. Всеки тип има своя специфичен обхват на приложение и механизъм за разделяне, като например нормална фаза HPLC за отделяне на анализа на базата на полярност, и обратна фаза HPLC за разделяне с помощта на хидрофобни взаимодействия.
Характеристиките на хроматографията на HPLC колона се отразяват главно в следните аспекти:
Висока ефективност на разделяне: HPLC позволява ефективно разделяне на сложни смеси благодарение на инфузионни помпи с високо налягане и колони с висока производителност.
Висока чувствителност: Съвременните детектори, като ултравиолетови абсорбционни детектори, флуоресцентни детектори, детектори за масспектрометрия и др., Направете HPLC да имат изключително висока чувствителност към откриване.
Широка обхват на приложения: HPLC не е ограничен от променливостта и топлинната стабилност на пробата и може да анализира термични нестабилни физиологични активни вещества с висока точка на кипене и не е лесно да се изпари.
Висока степен на автоматизация: Повечето съвременни HPLC инструменти са оборудвани с автоматичен проби и процесор за данни, които могат да реализират автоматизацията на анализа и бързата обработка на данни.
 |
 |
 |
 |
Специфично приложение в анализа на лекарствата
HPLC може да се използва за анализ на лекарствения състав, за да се определят активните съставки и вредните примеси на лекарствата. Например, чрез анализ на флавоноиди, алкалоиди и други активни съставки в китайските лечебни материали, видовете и съдържанието на активни съставки могат да бъдат определени, за да се гарантира качеството и ефикасността на лекарствата. В допълнение, HPLC може да се използва и за анализ на лекарствения състав в западните фармацевтични дозирани форми, като инжекции, таблетки, капсули и др., За да се гарантира, че съставът на лекарството в лекарството отговаря на определените изисквания.
HPLC играе важна роля за определянето на концентрацията на лекарството. Чрез точно определяне на съдържанието на лекарства в лекарството може да се гарантира безопасността и ефективността на лекарството. Например, при анализа на антибиотичните лекарства, HPLC може да се използва за определяне на съдържанието на антибиотик в лекарството за оценка на антибактериалния ефект на лекарството. В допълнение, HPLC може да се използва и за определяне на концентрацията на лекарства в организми, като плазма, урина, тъкан и други биологични проби, за оценка на ефикасността и нежеланите реакции на лекарствата.
HPLC също играе важна роля в оценката на качеството на наркотиците. Сравнявайки аналитичните данни на различни партиди лекарства, е възможно да се оцени дали качеството на лекарствата е стабилно. В допълнение, HPLC може да се използва и за изследване на ефикасността и фармакокинетичните характеристики на новите лекарства, предоставяйки научна основа за развитието и пускането на пазара на нови лекарства. Например, в етапа на разработване на нови лекарства, абсорбцията, разпространението, метаболизмът и екскрецията на нови лекарства при животни могат да бъдат определени чрез HPLC, така че да се разбере ефикасността и фармакокинетичните характеристики на новите лекарства и да осигурят силна подкрепа за клинични изпитвания и маркетингови приложения на нови лекарства.
Хиралните лекарства се отнасят до лекарствени молекули с хирални центрове и техните енантиомери могат да варират значително in vivo активност, метаболизъм и токсичност. Следователно е от голямо значение да се изолират и определят енантиомерите на хиралните лекарства. Тази хроматография играе важна роля в хиралния анализ на лекарствата. Чрез въвеждане на хирална стационарна фаза или хирална подвижна фаза добавка, хиралните лекарствени енантиомери могат да бъдат разделени и определени ефективно. Например, за оптически активни лекарства за аминокиселини, различни енантиомери могат да бъдат разделени и определени от тази хроматография за оценка на биологичната активност и токсичността на лекарството.
Естествените лекарства идват от широк спектър от източници със сложни състави и могат да съдържат различни биоактивни съединения. Колонната хроматография играе важна роля в анализа на естествените лекарства. Чрез оптимизиране на хроматографските състояния и избора на подходяща мобилна фаза може да се реализира ефективно разделяне и определяне на активни компоненти в естествените лекарства. Например, този метод на хроматография е използван за разделяне и определяне на активните компоненти на китайската билкова медицина, като флавоноиди и сапонини, за разбиране на техните видове и съдържание и за осигуряване на силна подкрепа за контрола на качеството, развитието и използването на китайската билкова медицина.
Предимства и предизвикателства на хроматографията на HPLC колона в анализа на лекарствата
Хроматографският метод има предимствата на високата ефективност на разделянето, високата чувствителност, широкия обхват на приложението и високата степен на автоматизация в анализа на лекарствата. Въпреки това, в практическо приложение, той също е изправен пред някои предизвикателства. Например, предварителната обработка на пробата е много взискателна, за да се гарантира чистотата и стабилността на пробата; Високи аналитични разходи, включително придобиване на инструменти, поддръжка, хроматографска и мобилна консумация на фаза; В допълнение, за някои компоненти със силна полярност или голямо молекулно тегло, HPLC може да не е в състояние напълно да се отдели или открие лошо. Следователно, в практически приложения трябва да бъде избран най -подходящият метод за анализ според изискванията за качество на специфичните лекарства и действителната ситуация.
Бъдеща перспектива
С напредъка на науката и технологиите и разработването на високоефективна течна хроматография технологията, приложението му в анализа на лекарствата ще бъде по -широко. От една страна, разработването на нови стационарни фазови материали значително ще разшири обхвата на приложението на високоефективна течна хроматография и ще подобри ефективността и селективността на разделянето. От друга страна, HPLC инструментите ще бъдат по -интелигентни и автоматизирани, наблюдавайки състоянието на колоната в реално време чрез интегрирани сензори, като ще позволят прогнозна поддръжка, намаляване на престоя и оптимизиране на експерименталните процеси. В допълнение, в комбинация с технологията за анализ на големи данни, системата може автоматично да регулира работните параметри, за да съответства на най -добрите условия за разделяне на различни проби, подобрявайки експерименталната ефективност и надеждността на резултатите. Тези постижения ще осигурят по -ефективни, точни и надеждни аналитични инструменти за анализ на лекарства, което ще доведе до развитието на откриването на лекарства и контрола на качеството.
В обобщение, този вид хроматография играе важна роля в анализа на лекарствата и има широки перспективи за приложение. Чрез непрекъснато оптимизиране на хроматографските състояния, избирането на подходящи мобилни и стационарни фази, въвеждане на нови технологии и оборудване за откриване, допълнително подобряване на неговата точност и надеждност в анализа на лекарствата и осигуряване на по -мощна подкрепа за разработване на лекарства, контрол на качеството и клинична употреба на лекарства.
Достойнства и демотити
Предимство
Ефективно разделяне
Хроматографията на HPLC колона използва инфузионна помпа с високо налягане и стационарна фаза с висока ефективност, което прави ефективността на колоната много по -висока от класическата течна хроматография и може да реализира ефективно разделяне на сложни смеси.
Висока чувствителност
Оборудвани с детектори с висока чувствителност, като ултравиолетови детектори, флуоресцентни детектори и др., Могат да открият ниски концентрации на проби, което е особено важно за анализ на следите.
Широко използван
Той не е ограничен от нестабилността и топлинната стабилност на пробата и може да анализира органичната материя с висока точка на кипене, лоша термична стабилност и голяма относителна молекулна маса и има широк спектър от приложения.
Добър избор
Има много видове мобилна фаза и селективността на разделянето може да бъде подобрена чрез промяна на вида и състава на мобилната фаза, за да се отговори на аналитичните изисквания на различни проби.
Висока степен на автоматизация
Повечето съвременни HPLC инструменти са оборудвани с автоматичен проби и процесор за данни, които могат да реализират автоматизацията на анализа и да подобрят ефективността на анализа.
Възстановяването на пробата е лесно
Пробата не се унищожава след преминаване през колоната и един компонент може да бъде събран или подготвен, което е удобно за последващи експерименти или приложения.
Недостатък
Цените и ежедневните разходи за поддръжка на течните хроматографи са високи, включително подмяна на колони, консумация на мобилна фаза и редовно калибриране на инструмента.
Макар и по -бързи от класическата течна хроматография, времето за анализ на HPLC все още е сравнително дълга в сравнение с газовата хроматография, особено за разделянето и анализа на сложни проби.
Въпреки че HPLC инструментите са силно автоматизирани, работата и поддръжката на инструментите все още изискват определено ниво на опит и опит. В допълнение, предварителната обработка на пробите може да бъде сложна.
Поради необратимата адсорбция на някои съединения в стационарната фаза, тези съединения може да не бъдат ефективно открити, като по този начин се отразяват на точността на анализа.
Разделянето на LC често се влияе силно от температурата на колоната и трябва да се поддържа постоянни температурни условия, за да се получат повтарящи се резултати, което увеличава сложността и цената на експеримента.
Предпазни мерки при определяне на съдържанието на наркотици
 |
 |
 |
Този метод има много предпазни мерки за определяне на съдържанието на лекарства, което е много важно, за да се гарантира точността и надеждността на резултатите от определянето. Ето някои ключови съображения:
Разликата на колоната ще повлияе на поведението на задържане на лекарството, дори ако дължината на колоната, вътрешния диаметър, размера на частиците на една и съща колона, поради различните свойства на пълнежа, времето за задържане и пиковият тип на лекарството може да бъде много различно. Следователно съответната колона трябва да бъде избрана според свойствата на лекарството и нуждите на разделянето.
Колоната трябва да се поддържа редовно, за да се избегне замърсяване и блокиране, за да се гарантира добрите му характеристики на разделяне.
PH на буферната сол на подвижната фаза има значителен ефект върху поведението на задържане на лекарствата и дори може да промени върховния ред на някои лекарства. Следователно, когато оптимизирате подвижната фаза, трябва да се обърне специално внимание на стойността на pH на буферната сол.
Съставът на подвижната фаза също влияе върху ефекта на разделяне на лекарството. Например при определяне на мултивитаминовите препарати промените в относителното съотношение на натриевия хексанесулфонат и натриев хептан сулфонат в подвижната фаза ще повлияят на времето на задържане и пиковата форма на всеки компонент. Следователно подходящият състав на мобилната фаза трябва да бъде избран според естеството на лекарството и аналитичните нужди.
Процесът на обработка на пробата трябва да гарантира представителността и стабилността на пробата, за да се избегне разграждането или замърсяването на пробата по време на обработката.
При претегляне на пробата трябва да се използва методът на добавката, за да я претегля на едно време, за да се гарантира точността на претеглянето. В същото време операцията на претегляне трябва да бъде стандартизирана, за да се избегне изтичане.
Качеството на референтното вещество оказва пряко влияние върху резултата от определянето на съдържанието. Следователно трябва да бъде избрано качеството на надеждно, точно съдържание.
Продуктите за контрол трябва да се съхраняват, както се изисква, за да се избегне разграждането или замърсяването. Ако контролният продукт се съхранява в хладилника, той трябва да се затопли в сушещата фурна преди претегляне.
Подходящият тип детектор трябва да бъде избран според естеството на лекарствените и аналитичните нужди, като ултравиолетов детектор, детектор за флуоресценция и др.
Детекторът трябва периодично да се калибрира, за да се гарантира точността на нейните резултати от измерването.
Разумен статистически анализ на данните за измерване, за да се гарантира надеждността и повторяемостта на резултатите. Например, относителното стандартно отклонение (RSD) на пиковата площ може да бъде изчислено за оценка на точността на резултатите от измерванията.
При изчисляване на съдържанието трябва да се използват надеждни методи като външни или вътрешни стандарти и трябва да се осигури линейността на стандартната крива.
При установяване на нов метод за определяне на съдържанието трябва да се извърши методологична проверка, включително специфичност, линейност, обхват, прецизност, точност, издръжливост и т.н.
Методологичната проверка е важно средство за гарантиране, че методът на измерване е научен, разумен и надежден.
Уверете се, че инструментът остава стабилен по време на процеса на анализ, особено при извършване на мулти-пинов анализ, обърнете внимание, за да наблюдавате дали стойността на отговора и пиковата форма на инструмента са стабилни.
Ако по време на процеса на анализ се появят ненормални данни, той трябва да бъде внимателно проверен и елиминиран и повторно анализиран, ако е необходимо.
Популярни тагове: Хроматография на колоната HPLC, China HPLC колона Производители на хроматография, доставчици, фабрика
Един чифт
Колона за индустриална хроматографияСледваща
Гравитационни хроматографски колониИзпрати запитване
