Хроматография с мащабна колона
video

Хроматография с мащабна колона

1. Глас хроматографска колона
2. Кроматографска колона (тип въртене)
3. Кроматографска колона (ръководство)
*** Ценовата листа за цялото по -горе, попитайте ни да получим
Изпрати запитване
Чат сега

Описание

Технически параметри

Голям мащабКолонна хроматографияе технология за разделяне и пречистване, широко използвана в химията, биологията, медицината и други области, тя е известна още като хроматография, е метод за разделяне на органични или неорганични вещества, използвайки принципа на баланса на дяла. При този метод разделянето на всеки компонент се реализира след няколко пъти разпределение и преразпределение чрез разликата в свойствата на разпределение между фиксираната фаза и течащата фаза. Принципът се основава на разпределението на съединенията между течната фаза и твърдата фаза, която е течно-твърда адсорбционна хроматография.

Ефектът на разделяне на голямата колона хроматография се влияе от много фактори, включително вида и естеството на неподвижната фаза, селекцията и скоростта на потока на подвижната фаза, размера и формата на колоната и вида и концентрацията на елуента. Чрез оптимизиране на тези условия може да се постигне ефективно разделяне и пречистване. Това е ефективна и надеждна технология за разделяне и пречистване и има широки перспективи за приложение в много области. Чрез оптимизиране на работните условия и избор на подходяща фиксирана и подвижна фаза може да се постигне ефективно разделяне и пречистване.

 

Параметри

Column chromatography parameter | Shaanxi Achieve chem-tech

 

Column chromatography parameter | Shaanxi Achieve chem-tech

 

Column chromatography parameter | Shaanxi Achieve chem-tech

Видове хроматография

Мащабната хроматография обхваща няколко различни техники, всяка от които използва уникални принципи за постигане на разделяне и пречистване на целевите молекули. Сред тези методи са йонен обмен, афинитет, изключване на размера и хидрофобна взаимодействие хроматография, всяка от които е съобразена със специфични нужди за разделяне въз основа на молекулярни свойства.

Йонна обменна хроматография

Широко използвана за способността му да отделя молекули въз основа на техния нетен заряд. В тази техника неподвижната фаза съдържа заредени групи, които взаимодействат с противоположно заредени молекули в пробата, което води до диференциално задържане и разделяне. Този метод е особено ефективен за протеини, нуклеинови киселини и други заредени биомолекули.

Афинитетна хроматография

Възползва се от специфични взаимодействия между целевата молекула и лиганд, който се обездвижва на стационарната фаза. Тази силно селективна техника често се използва за пречистване на протеини с висока специфичност, като антитела или ензими, като използва техните уникални афинитети на свързване към лиганди като антигени или субстрати.

Хроматография за изключване на размера

Известна също като хроматография на гел филтрация, разделя молекулите въз основа на техния размер и форма. По -големите молекули се елуират първо, тъй като те са изключени от влизането в порите на неподвижната фаза, докато по -малките молекули отнемат повече време, за да се елуират, докато проникват в тези пори. Този метод е ценен за анализ на разпределението на молекулното тегло и пречистване на протеини въз основа на размера.

Хроматография на хидрофобна взаимодействие

Разчита на разликите в хидрофобността сред молекулите. В тази техника неподвижната фаза съдържа хидрофобни лиганди, които взаимодействат с неполярни региони на молекулите на пробата. Молекулите с по -висока хидрофобност проявяват по -силни взаимодействия и се задържат по -дълго, което позволява отделянето им от по -малко хидрофобни компоненти.

Всяка от тези хроматографски техники предлага уникални предимства и се избира въз основа на специфичните свойства на целевите молекули и желания резултат от разделяне. Заедно те формират мощен набор от инструменти за мащабно пречистване и анализ в биотехнологиите, фармацевтичните продукти и други индустрии.

Large Scale Column Chromatography | Shaanxi Achieve chem-tech

Large Scale Column Chromatography | Shaanxi Achieve chem-tech

Large Scale Column Chromatography | Shaanxi Achieve chem-tech

приложения

Хроматография с мащабна колонаИграе основна роля в множество индустрии, използвайки способността му да разделя и пречиства сложни смеси с висока точност и ефективност. В сектора на биотехнологиите тази техника е незаменима за пречистване на протеини, използвани в терапевтичните приложения. Например, той е от съществено значение за изолиране на моноклонални антитела и производство на ваксини, където отстраняването на примесите е от решаващо значение за осигуряване на безопасността и ефикасността.

За моноклонални антитела

 

Моноклоналните антитела (MAbs) са силно специфични, лабораторни произвеждани молекули, проектирани да имитират способността на имунната система да разпознава и неутрализира чужди вещества, като вируси и бактерии. За разлика от поликлоналните антитела, които са получени от множество имунни клетки и могат да се свързват с различни епитопи, моноклонални антитела се произвеждат от един клонинг на В-клетки, гарантирайки равномерност и специфичност при свързване с един епитоп.

● Производство и структура

Моноклоналните антитела обикновено се произвеждат чрез хибридома технология, където специфична В-клетка се слива с миелома клетка за създаване на хибридна клетъчна линия, способна на непрекъснат растеж и производство на антитела. Алтернативно, рекомбинантната ДНК технология позволява производството на MAbs in vitro, използвайки клетки на гостоприемника, като клетки от яйчници на китайски хамстер (CHO). Структурно, MAbs са големи, Y-образни протеини, съставени от две тежки вериги и две светлинни вериги, с антиген-свързващи места, разположени на върховете на "Y."

● Приложения

В медицината моноклоналните антитела революционизират стратегиите за лечение на различни заболявания. Те се използват в терапията с рак за насочване на специфични антигени върху туморните клетки, засилвайки имунния отговор срещу рак. Например, MAbs като Trastuzumab (Herceptin) се насочват към нея 2- положителни клетки на рак на гърдата, подобрявайки резултатите от пациента. При автоимунни заболявания MAbs могат да модулират имунната система за намаляване на възпалението, както се вижда от адалимумаб (Humira) за ревматоиден артрит.

Моноклоналните антитела също играят критична роля в диагностиката, което позволява прецизно откриване на биомаркери за заболявания като ХИВ, хепатит и някои ракови заболявания. Тяхната висока специфичност ги прави безценни инструменти в изследванията, улеснявайки изследването на клетъчните процеси и развитието на нови терапии.

● Предимства и предизвикателства

Основното предимство на моноклоналните антитела е тяхната висока специфичност, която свежда до минимум ефектите и повишава терапевтичната ефикасност. Въпреки това трябва да се разрешат предизвикателства като високи производствени разходи, необходимостта от съхранение на студ и потенциална имуногенност. Напредъкът в инженерството на антитела, включително развитието на биспецифични антитела и конюгати на лекарства-лекарства, разширяват своите терапевтични приложения и подобряват фармакокинетичните си свойства.

Като цяло моноклоналните антитела представляват крайъгълен камък на съвременната медицина и биотехнологии, предлагащи целеви терапии и диагностична точност, които продължават да трансформират здравеопазването.

Във фармацевтичната индустрия хроматографията на мащабната колона е жизненоважна за производството на активни фармацевтични съставки с висока чистота (API). Способността на техниката да постига високи нива на чистота е от решаващо значение за спазване на строгите регулаторни стандарти и осигуряване на качеството и последователността на лекарствата. Чрез ефективно отделяне на целевите съединения от замърсителите, той допринася значително за развитието на безопасни и ефективни лекарства.

Отвъд биотехнологиите и фармацевтичните продукти, той намира приложения в индустрията за храни и напитки. Използва се за изясняване на сокове, премахване на нежелани компоненти като танини, пектини и микроорганизми, като по този начин подобрява яснотата на продукта, аромата и срока на годност. Това приложение подчертава гъвкавостта на техниката за подобряване на качеството и безопасността на потребителските продукти.

В науката за околната среда се използва за процеси на пречистване на водата. Той помага за отстраняването на замърсители и замърсители от източници на вода, допринасяйки за осигуряването на чиста и безопасна питейна вода. Това приложение подчертава потенциала на техниката да се справи с предизвикателствата на околната среда и да подкрепи устойчивите практики.

 

Избор и прилагане на методи за количествен анализ

Large Scale Column Chromatography | Shaanxi Achieve chem-tech
Large Scale Column Chromatography | Shaanxi Achieve chem-tech
Large Scale Column Chromatography | Shaanxi Achieve chem-tech

Като важна технология за разделяне и анализ, колоната хроматография е широко използвана при анализ на лекарства, мониторинг на околната среда, безопасност на храните и други области. При количествен анализ е много важно да се избере подходящият аналитичен метод, за да се определи точно съдържанието на всеки компонент в извадката. Следва подробна дискусия относно подбора и прилагането на методите за количествен анализ чрез голяма колона хроматография.

 

Изборът на методи за количествен анализ

При голяма колона хроматография често използваните методи за количествен анализ включват основно нормализиране, външен стандартен метод (включително стандартен метод на крива и метод за корекция на единична точка), вътрешен стандартен метод и метод на стандартен добавяне. Изборът на тези методи зависи от естеството на извадката, целта на анализа и експерименталните условия.

 
Метод за нормализиране

Методът на нормализиране е количествен метод за обобщение на всички пикови компоненти със 100%. Методът е прост и точен и е особено подходящ за ситуации, при които всички компоненти в пробата могат да изтичат от колоната и да генерират сигнали на детектора. Когато корекционните фактори на всеки компонент са последователни, методът на нормализиране е добър избор. Този метод обаче изисква всички компоненти да могат да достигнат връх без припокриващи се пикове, което може да бъде трудно постижимо в някои сложни проби.

 
Външен стандартен метод

Външният стандартен метод е количествен метод чрез изготвяне на стандартна работна крива. Стандартният метод на кривата е да се подготви поредица от концентрация на референтния продуктов разтвор с референтното вещество, при същите хроматографски условия като компонента, който трябва да се измерва, и да се нарисува стандартната работна крива на концентрацията на пробата с пиковата площ или височината на пика. Правилото за корекция на единичната точка е, че когато съдържанието на компонента, който трябва да бъде измерено, не се променя много и приблизителното съдържание е известно, за корекция се използва стандартно решение, близко до съдържанието на компонента, който трябва да се измерва. Външният стандартен метод е лесен за работа и подходящ за анализ на големи количества проби, но той има високи изисквания за размера на извадката и оператора, а резултатът е лесен за неточен поради грешката в работата.

 
Вътрешен стандартен метод

Вътрешният стандартен метод е метод, който избира подходящото вещество като препратка на компонента, който трябва да бъде измерен, количествено го добавя към пробата и извършва количествен анализ според съотношението на стойността на отговора на компонента, който трябва да бъде измерен, и референцията на детектора и количеството на добавената референция. Ключът на вътрешния стандартен метод е да се избере подходящият вътрешен стандарт, който трябва да бъде чисто вещество, което не съществува в оригиналната проба, има сходни свойства на компонента, който трябва да се измерва, не реагира с тестваната проба и може да бъде напълно разтворен в тестваната проба. Вътрешният стандартен метод има висока точност и може да коригира влиянието на промяната на количеството на пробата и малката промяна на хроматографските условия върху резултатите от определянето. Трудно е обаче да се избере подходящият вътрешен стандарт и вътрешният стандарт трябва да се претегля точно и операцията е обезпокоителна.

 
Стандартен метод за добавяне

Стандартният метод за добавяне по същество е специален вътрешен стандартен метод, който трябва да се вземе чистото вещество на компонента, който да бъде измерен като вътрешен стандарт, който да се добави към пробата, която да бъде измерена, когато подходящият вътрешен стандарт не е избран, и след това се определя при същите хроматографски условия. Методът не се нуждае от друг стандартен материал като вътрешен стандарт, само чистото вещество на компонента, което трябва да бъде измерено, количеството на инжектиране не е необходимо да е много точно и операцията е проста. Необходимо е обаче хроматографските условия на двете хроматографски измервания преди и след добавяне на компонентите, които трябва да бъдат измерени, са абсолютно същите, за да се гарантира, че корекционните фактори на двете измервания са точно равни.

 
 

 

Прилагането на голям метод за количествен анализ на хроматография с големи колони

В хроматография с голяма колона трябва да се определя изборът на метод за количествен анализ според естеството на извадката и целта на анализа. Например, при анализа на лекарството, вътрешният стандартен метод или методът на стандартен добавяне често се използва за подобряване на точността на определяне поради сложността на лекарствените компоненти и големите разлики в съдържанието. В областта на мониторинга на околната среда и безопасността на храните, поради големия размер на извадката и необходимостта от бърз анализ, външният стандартен метод, особено методът за корекция на единичната точка, се използва широко поради простата си работа.

В допълнение, следните точки трябва да се отбележат в практически приложения:

 Изберете дясната колона и опаковане: Изберете дясната колона и опаковане според естеството на извадката и целта на анализа, за да подобрите ефекта на разделяне и точността на определяне.

 Оптимизиране на хроматографските условия: Чрез регулиране на състава, пропорцията и скоростта на потока на подвижната фаза и други хроматографски условия оптимизират ефекта на разделяне и чувствителността към определяне.

 Строг контрол на експерименталните условия: Експерименталните условия като температура и влажност трябва да бъдат строго контролирани по време на експеримента за намаляване на грешките и подобряване на надеждността на резултатите от измерванията.

 Редовна поддръжка и калибриране на инструменти: Редовна поддръжка и калибриране на хроматографски инструменти, за да се осигури стабилни и надеждни показатели.

 

принцип

Хроматографията на мащабната колона работи на принципа на диференциална миграция на компонентите на пробите, тъй като те взаимодействат със стационарна фаза, докато се носят от подвижна фаза през колона. Тази хроматографска техника е основна при разделяне и пречистване на сложни смеси от биологични молекули и други съединения в индустриален мащаб.

Стационарната фаза, често състояща се от порести мъниста или смоли, предлага огромна повърхност, която улеснява взаимодействията с молекулите на пробата. Тези взаимодействия могат да се основават на различни физикохимични свойства, като размер, заряд, хидрофобност или специфични афинитети на свързване. Изборът на неподвижна фаза е от решаващо значение, тъй като определя селективността и ефективността на процеса на разделяне.

Мобилната фаза, обикновено течен разтворител или буфер, служи за транспортиране на пробата през колоната. Докато компонентите на пробата се движат през колоната, те изпитват различни времена на задържане в зависимост от взаимодействията им със стационарната фаза. Компонентите с по -силни взаимодействия със стационарната фаза мигрират по -бавно, докато тези с по -слаби взаимодействия се елитат по -бързо.

Тази диференциална миграция води до разделяне на компонентите на пробите въз основа на техните индивидуални свойства. Например, при йонообменна хроматография, йони се разделят въз основа на техния заряд, докато по хроматография за изключване на размера, разделянето се осъществява според молекулярния размер. Възможността за адаптиране на стационарната и мобилната фаза позволява многостранни приложения в различни индустрии, включително биотехнологии, фармацевтични продукти и химическо производство.

 

Иновации и бъдещи тенденции

Large Scale Column Chromatography | Shaanxi Achieve chem-tech

Симулирана хроматография с подвижно легло (SMB)

Принцип: Използва множество колони в непрекъснат цикъл, за да симулира потока на противотока, подобрявайки ефективността на добива и разтворителя.

Приложение: Пречистване на хирални съединения (напр. Ибупрофен енантиомери).

Непрекъсната хроматография

Предимства:

Намалява употребата на разтворители с 50%.

Увеличава производителността 3 - 5- сгъване.

Случай: GSK използва непрекъсната хроматография за производство на лекарства за ХИВ.

Мембранна хроматография

Принцип: Използва порести мембрани с имобилизирани лиганди за бързи раздели с висок поток.

Приложение: Полиране на стъпки в биофармацевтичните продукти (напр. Премахване на вируси).

Изкуствен интелект (AI) в разработването на методи

Инструменти: Алгоритмите за машинно обучение прогнозират оптимални градиенти, дебити и типове смоли.

Случай: Мерк използва AI за намаляване на времето за развитие на хроматографията с 40%.

 

Популярни тагове: Хроматография с мащабна колона, производители на хроматография с мащабна колона, доставчици, фабрика

Изпрати запитване